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本生詳解:ELISA試劑盒定性和定量的測定
ELISA試劑盒定性測定:
定性測定的效果判別是對受檢標(biāo)本中是不是含有待測抗原或抗體作出“有"或“無"的簡略答復(fù),分別用“陽性"、“陰性"標(biāo)明?!瓣栃?標(biāo)明該標(biāo)本在該測定體系中有反應(yīng)?!瓣幮?則為無反應(yīng)。用定性判別法也可得到半定量效果,即用滴度來標(biāo)明反應(yīng)的強(qiáng)度,其實(shí)質(zhì)仍是一個(gè)定性試驗(yàn)。
ELISA試劑盒在這種半定量測定中,將標(biāo)本作一系列稀釋后進(jìn)行試驗(yàn),呈陽性反應(yīng)的zui高稀釋度即為滴度。根據(jù)滴度的凹凸,可以判別標(biāo)本反應(yīng)性的強(qiáng)弱,這比查詢不稀釋標(biāo)本呈色的深淺判別為強(qiáng)陽性、弱陽性更具定量意義。
ELISA試劑盒定量測定:
ELISA操作過程凌亂,影響反應(yīng)要素較多,特別是固相載體的包被難抵達(dá)各個(gè)別之間的一起,因此在定量測定中,每批檢驗(yàn)均須用一系列不相同濃度的參看標(biāo)準(zhǔn)品在相同的條件下制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。
ELISA試劑盒測定大分子量物質(zhì)的夾心法ELISA,標(biāo)準(zhǔn)曲線的規(guī)模一般較寬,曲線zui高點(diǎn)的吸光度可接近2.0,繪制時(shí)常用半對數(shù)紙,以查看物的濃度為橫坐標(biāo),以吸光度為縱坐標(biāo),將各濃度的值逐點(diǎn)聯(lián)接,所得曲線一般呈S形,其頭、尾部曲線趨于平整,中心較呈直線的有些是的查看區(qū)域。
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