本生課堂：熒光定量PCR(qPCR)檢測服務(wù)(含內(nèi)參)

　　一、服務(wù)概述

　　實時熒光定量PCR(Real Time PCR)技術(shù)，是指在PCR指數(shù)擴增期間通過連續(xù)監(jiān)測熒光信號強弱的變化來即時測定特異性產(chǎn)物的量，最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進行定量分析的方法。熒光定量PCR的熒光檢出方法包括SYBR green(熒光染料摻入法) 和Taqman probe (探針法)兩種方法。

　　二、服務(wù)內(nèi)容

　　1.從動物細胞、人或動物組織等樣品中提取核酸;

　　2.對核酸進行濃度及純度分析;

　　3.熒光定量PCR檢測;

　　(1)引物和探針的設(shè)計與合成;

　　(2)絕對定量和相對定量的選擇;

　　(3)探針法和染料法的選擇;

　　(4)熒光定量PCR儀對目的基因的檢測;

　　(5)數(shù)據(jù)統(tǒng)計和分析;

　　4.預(yù)實驗服務(wù)：根據(jù)客戶提供的目的基因序列或NCBI序列號提供客戶引物和探針，并篩選出化的引物和探針;

　　5.正式實驗服務(wù)：根據(jù)預(yù)實驗篩選的引物和探針對所用樣品進行熒光定量PCR的檢測，并對結(jié)果進行統(tǒng)計和分析。

　　三、樣品要求

　　細胞>1×106個;組織>50mg;細菌濕重>50mg

　　項目服務(wù) 內(nèi)容 周期(工作日)

　　抽提樣品DNA或RNA 細胞樣品 5

　　組織樣品 5

　　引物設(shè)計與合成 優(yōu)化引物&探針設(shè)計及合成 7

　　優(yōu)化引物設(shè)計及合成 5

　　引物合成 3

　　RT反應(yīng) mRNA反轉(zhuǎn)錄成cDNA 5

　　標(biāo)準(zhǔn)曲線制作 相對定量(雙標(biāo)準(zhǔn)曲線法) 5

　　絕對定量

　　熒光PCR檢測 基因 10

　　四、客戶需提供

　　1.請?zhí)峁┬迈r材料或直接提供已純化的DNA/RNA，確保總量>5μg/樣品。如果目的基因表達量較低時，應(yīng)盡量提供更高濃度的總RNA或DNA;

　　2.請?zhí)峁┮阎娜L基因序列(GeneBank Accession Number、Gene ID);

　　3.請?zhí)峁┍M可能詳細的背景資料：生物物種信息(Human、Mouse、Rat等)、DNA/RNA來源、豐度等;

　　4.客戶可以提供引物，沒有引物的情況下，本公司幫助設(shè)計合成。

　　五、BUSNEN本生提供

　　1.RNA抽提和PCR擴增電泳結(jié)果的數(shù)碼拍照，定量PCR實驗結(jié)果原始文件及相關(guān)軟件;

　　2.提供實驗報告，包括實驗方法、步驟、所用試劑、儀器、數(shù)碼照片及相關(guān)分析數(shù)據(jù)等，如有必要可以協(xié)助客戶進行相關(guān)的數(shù)據(jù)處理和分析。

　　抗體本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命，追求企業(yè)競爭力的不斷提升。公司在經(jīng)營中始終秉承：遵紀(jì)守法，嚴(yán)于律己，寬仁以待，敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn)，以過硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來維護和拓展市場，較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏，是我們的發(fā)展目標(biāo)。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作，共創(chuàng)美好的未來。