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ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果白板且陽性對照不顯色原因是?

更新時(shí)間:2023-08-08    點(diǎn)擊次數(shù):2275

  ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果白板且陽性對照不顯色原因是?


  ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)結(jié)果白板,而且陽性對照不顯色,常見原因如下:

  a)可能原因:漏加或者誤加試劑;

  解決方法:檢查試驗(yàn)記錄和剩余試劑。每次加液前均應(yīng)核對標(biāo)簽。

  b)可能原因:試劑過期;

  解決方法:使用有效期內(nèi)的產(chǎn)品。

  c)可能原因:洗板液配制中出現(xiàn)問題,如量筒不干凈含HRP酶抑制物;

  解決方法:使用干凈的器皿,正確配制試劑。


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  d)可能原因:溫育的時(shí)間或溫度不夠;

  解決方法:校正溫育箱溫度。

  e)可能原因:標(biāo)準(zhǔn)品失活或者丟失;

  解決方法:標(biāo)準(zhǔn)品正確保存、溶解和混勻。

  f)可能原因:抗體失活或者丟失;

  解決方法:更換抗體或者提高抗體濃度

  g)可能原因:酶失活或者丟失

  檢查方法:把工作濃度的酶再稀釋20-100倍,取5uL加入50ul的顯色底物,終止后顯色是否能達(dá)到1.0左右,此為酶的粗略估計(jì)。

  解決方法:更換酶或者提高酶的濃度。

  h)可能原因:顯色底物失活

  檢查方法:加少量的工作濃度的酶,TMB是否很快顯色。

  解決辦法:更換顯色底物。

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